廣州檢驗科PCR實驗室裝修設計

從PCR實驗室平面布局、通風空調系統(tǒng)兩個方面進行設計要點分析，供設計和建設單位的相關人員參考。

PCR實驗室平面布局設計要點分析

1、平面功能分區(qū)要點分析

根據《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》1.1條的要求，PCR實驗室一般由試劑儲備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增分析區(qū)4個區(qū)域組成。

PCR實驗室區(qū)域的設置并不是一成不變的，以下幾種情況需要說明：

①如果樣本在擴增之前需要粉碎處理，則需要增加一個區(qū)域用于樣品的粉碎;

②如果采用實時熒光PCR法，則擴增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個區(qū);

③如果采用全自動化PCR分析儀，則標本制備區(qū)、擴增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個區(qū)。

以4個區(qū)域的實驗室設置進行設計要點分析，如圖所示。

▲圖1 典型PCR 實驗室工藝平面圖

2、實驗室功能與設備設計要點分析

(1)試劑儲備區(qū)

該區(qū)域主要完成試劑和主反應混合液的儲存、配制和封裝工作。所有運送到該區(qū)域的試劑和材料不應經過其他區(qū)域，試劑和原材料應在本區(qū)內儲存和制備。本區(qū)域的氣壓應相對外界保持正壓。該區(qū)域的設備主要是冰箱、天平、混勻器、低速離心機、加樣器、可移動紫外燈等。由于該區(qū)域有多種試劑，所以“安全"應是平面設計首要考慮因素，平面設計時應保持通風流暢、逃生暢通。首先，實驗臺布置在房間的兩側，中間的過道全部通向走廊便于疏散。同時根據人體工程學的標準，實驗臺與實驗臺通道設計為1500mm，中間的通道可滿足兩邊坐人中間過人的要求。

(2)標本制備區(qū)

該區(qū)域的功能是樣本的保存、核酸提取和貯存、樣本加入擴增反應管和測定DNA的合成。樣本應直接運送至該區(qū)并儲存在本區(qū)內，不得經過其他區(qū)域。對于氣流壓力的控制，由于在本區(qū)內加樣操作可能產生氣溶膠，為避免氣溶膠擴散出去對外界造成污染，本區(qū)應對外界保持負壓;同時本區(qū)相對于擴增反應混合物配制和擴增區(qū)以及擴增產物分析區(qū)為正壓，以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。

該區(qū)域的設備主要是生物安全柜、加樣器、臺式高速離心機、臺式低速離心機、水浴鍋、冰箱、混勻器和可移動紫外燈等。其中需要注意的是，生物安全柜.好選用B2型，這種生物安全柜所有的吸入氣流和垂直氣流都經過高效過濾器過濾后排到室外，不再進入生物安全柜循環(huán)或者返回該區(qū)域，這種生物安全柜可避免提取核酸在柜內反復循環(huán)，造成標本之間交叉“污染"，出現(xiàn)假陽性結果。

(3)擴增區(qū)

該區(qū)域的功能是DNA擴增和擴增片段的測定。此外，反應混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應混合液和已制備的DNA模板(來自標本制備區(qū))的加入等也可在本區(qū)內進行。對于氣流壓力的控制，相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區(qū)內不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。

該區(qū)域的設備主要是核酸擴增熱循環(huán)儀、加樣器、超凈臺等。其中熱循環(huán)儀的電源應，并配備一個穩(wěn)壓電源或UPS，以防止由于電壓的波動對擴增測定的影響。

(4)分析區(qū)

該區(qū)域的功能是擴增產物的分析。該區(qū)域可能會用到某些可致基因突變的有毒物質，應特別注意實驗人員的安全防護。對于氣流壓力的控制，該區(qū)域是PCR實驗的后一步，壓力應為.低，相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區(qū)內的不必要的走動。

該區(qū)域的設備主要是加樣器、電泳儀(槽)、電轉印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀、酶標儀和洗板機等。

3、人流與物料流線設計要點分析

進入實驗室區(qū)域工作人員應該按照以下路徑：

走道→緩沖間→實驗區(qū)

工作人員退出實驗室的路徑為：

實驗區(qū)→緩沖間→走道

進入各個區(qū)域必須嚴格按照單一方向進行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開時，不得將工作服帶出。這種人員的單向流動可以降低因人員的流動帶來的交叉污染風險。

所有的物品進入實驗區(qū)必須經過雙扉互鎖傳遞窗，利用傳遞窗消毒后才可進入，實驗室內所有物品也必須經過傳遞窗才可以傳遞到實驗室以外的清潔公共區(qū)。這種物品有組織的單向流動可以降低物品的差錯和混淆的風險。

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